产品货号：
JN5061
中文名称：
2×Fast Taq MasterMix(含染料)
英文名称：
2×Fast Taq PCR Master Mix(Quick Load)
产品规格：
5mL|25mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品采用2×MasterMix形式，将PCR反应所需的PCR聚合酶、dNTPs、MgCl2、上样染料以及反应缓冲液预先配置成2倍浓度的混合物。使用时只需再加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，大大地简化了操作过程，减少了PCR操作过程中的污染。上样染料的加入不影响PCR反应，且在PCR反应完成后可直接电泳，节省时间。
本制品采用了新型的Fast Taq酶，该酶是采用分子进化技术在普通Taq酶基础上改造、制备的新型快速聚合酶，其扩增速度为普通Taq酶的数倍，72℃保温15秒可延伸1000bp以上，因此可大幅度减少PCR延伸过程所需要的时间，达到缩短整个PCR反应的目的。
- 常规PCR鉴定；
- 小片段目标基因克隆；
- 平端PCR产物加A。
- 省时：配以高速PCR聚合酶Fast Taq大幅缩短PCR鉴定所需时间。
- 省事：PCR反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配制。
- 便利：PCR反应后可直接电泳。
- 高效：以λDNA为模板，扩增长度可达8kb，能高效扩增≤4kb片段。
- 稳定：反复冻融几十次，4℃放置30天，室温放置一周后，扩增性能不受影响。
| 组分 | 5mL | 25mL |
| 2×Fast Taq MasterMix(含染料) | 5×1mL | 25×1mL |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
保存：-20℃
经检测无外源核酸酶残留，qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
使用本试剂盒扩增得到的PCR产物3′端有一突出"A"碱基，可直接克隆于T载体中。
- 需溶解完全后使用，防止离子浓度不均匀。
- 菌液PCR时预变性≥5min，更有利于破壁。
- 应根据实验目的选择合适的循环数，循环数过少，会造成扩增量不足。循环数过多，扩增量增加，但突变率会增加，并造成非特异性扩增。
- 根据引物Tm值设置合适的退火温度，退火温度过低，会造成非特性扩增。退火温度过高，可能扩增不到目的条带。
- 常用反应体系
注：Mg2+终浓度为2mM。成分 用量 2×Fast Taq MasterMix(含染料) 25μL 上游引物 0.2～1.0μM（终浓度） 下游引物 0.2～1.0μM（终浓度） 模板（请根据实际使用模版
进行选择，二选一即可）1～50ng（质粒）
1ng～500g（基因组）ddH2O 至50μL - 推荐PCR反应程序
- 当扩增片段＜3K：
循环数 温度 时间 1 94℃ 90s 30 94℃ 20s 50～60℃ 20s 72℃ 1kb/30s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温 - 当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp)：
循环数 温度 时间 1 94℃ 5min 30 94℃ 5s 68℃ 1kb/30s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温
- 当扩增片段＜3K：
50μL扩增体系中，分别以50ng～0.05ng小鼠基因组DNA为模板，可对特定基因片段（1.1kb）进行很好的扩增。
泳道1：50ng；泳道2：5ng；
泳道3：0.5ng；泳道4：0.05ng；
泳道M：DNA Ladder 2000。
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